Комплект за чисти клетки/бактерии RNAprep

За пречистване на висококачествена обща РНК от клетки и бактерии.

Комплектът RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit осигурява бърз, прост и рентабилен метод за пречистване на общата РНК от култивирани клетки и бактериални проби чрез използване на ефективна спинова колона и уникална буферна система. Комплектът включва спинална колона CR3 без РНКаза за пречистване на висококачествена РНК чрез използване на мембрана със силициев диоксид. Висококачествена обща РНК може да бъде получена за 30-40 минути с висока чистота и е без протеини и геномна ДНК замърсяване.

Котка Не Размер на опаковката
4992235 50 подготовки

Подробности за продукта

Експериментален пример

ЧЗВ

Етикети на продукти

Характеристика

■ Оптимизираните буфери и протоколи за култивирани клетки и проби от бактерии правят процеса прост и удобен.
■ Уникална ДНКаза I минимизира замърсяването с геномна ДНК.
■ Уникални филтрационни колони без РНКаза CS елиминират други замърсявания.
■ РНК с висока чистота и готова за употреба е подходяща за чувствителни приложения надолу по веригата.
■ Не се изисква извличане на фенол/хлороформ, не се утаяват LiCl и етанол, не се налага центрифугиране с градиент на CsCl, което прави процеса безопасен и надежден.

Приложения

■ RT-PCR.
■ Северна петна, точкова петна.
■ PCR в реално време.
■ Чип анализ.
■ ПолиА скрининг, in vitro транслация, анализ на защитата с РНКаза и молекулно клониране.

Всички продукти могат да бъдат персонализирани за ODM/OEM. За детайли,моля, щракнете върху Персонализирана услуга (ODM/OEM)


  • Предишна:
  • Следващия:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example Материал: човешки клетки Jurkat (1 × 106 )
    Метод: Общата РНК на човешките клетки Jukat се изолира с помощта на RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit.
    Резултати: Моля, вижте горната снимка на електрофореза с агарозен гел. 2-4 μl от 50 μl елуати се зареждат на лента. Електрофорезата се провежда при 6 V/cm за 30 минути върху 1% агарозен гел.
    Experimental Example Материал: TOP10 E.coli (1 × 108)
    Метод: Общата РНК на TOP10 E.coli се изолира с помощта на RNAprep Pure Cell/Bacteria Kit.
    Резултати: Моля, вижте горната снимка на електрофореза с агарозен гел. 2-4 μl от 50 μl елуати се зареждат на лента. Електрофорезата се провежда при 6 V/cm за 30 минути върху 1% агарозен гел.
    В: Запушване на колони

    А-1 Клетъчен лизис или хомогенизация не са достатъчни

    ---- Намалете използването на проби, увеличете количеството на лизисния буфер, увеличете хомогенизацията и времето за лизис.

    A-2 Количеството на пробата е твърде голямо

    ---- Намалете количеството използвана проба или увеличете количеството на лизисния буфер.

    В: Нисък добив на РНК

    А-1 Недостатъчен клетъчен лизис или хомогенизация

    ---- Намалете използването на проби, увеличете количеството на лизисния буфер, увеличете хомогенизацията и времето за лизис.

    A-2 Количеството на пробата е твърде голямо

    ---- Моля, вижте максималния капацитет за обработка.

    А-3 РНК не се елуира напълно от колоната

    ---- След добавяне на вода без РНКаза, оставете я за няколко минути преди центрофугиране.

    А-4 Етанол в елуента

    ---- След изплакване, центрофугирайте отново и отстранете измиващия буфер колкото е възможно повече.

    А-5 Клетъчната хранителна среда не се отстранява напълно

    ---- Когато събирате клетки, моля, не забравяйте да премахнете хранителната среда колкото е възможно повече.

    А-6 Клетките, съхранявани в RNAstore, не се центрофугират ефективно

    ---- плътността на RNAstore е по-голяма от средната среда за клетъчна култура; така че центробежната сила трябва да се увеличи. Препоръчва се центрофугиране при 3000x g.

    A-7 Ниско съдържание на РНК и изобилие в пробата

    ---- Използвайте положителна проба, за да определите дали ниският добив е причинен от пробата.

    В: Разграждане на РНК

    A-1 Материалът не е свеж

    ---- Пресните тъкани трябва незабавно да се съхраняват в течен азот или веднага да се поставят в реагента RNAstore, за да се осигури екстракционният ефект.

    A-2 Количеството на пробата е твърде голямо

    ---- Намалете количеството проба.

    Замърсяване с А-3 РНКазаn

    ---- Въпреки че буферът, предоставен в комплекта, не съдържа RNase, е лесно да се замърси RNase по време на процеса на екстракция и с него трябва да се работи внимателно.

    А-4 Замърсяване с електрофореза

    ---- Сменете буфера за електрофореза и се уверете, че консумативите и зареждащият буфер не са замърсени с РНКаза.

    А-5 Твърде много натоварване за електрофореза

    ---- Намалете количеството зареждане на пробата, натоварването на всяка ямка не трябва да надвишава 2 μg.

    В: ДНК замърсяване

    A-1 Количеството на пробата е твърде голямо

    ---- Намалете количеството проба.

    А-2 Някои проби имат високо съдържание на ДНК и могат да бъдат третирани с ДНКаза.

    ---- Извършете третиране с ДНКаза без РНКаза към получения разтвор на РНК и РНК може директно да се използва за последващи експерименти след третиране или може да бъде допълнително пречистена чрез комплекти за пречистване на РНК.

    В: Как да премахнете RNase от експериментални консумативи и стъклария?

    За стъклени съдове, изпечени при 150 ° C в продължение на 4 часа. За пластмасови контейнери, потопени в 0,5 М NaOH за 10 минути, след това старателно се изплакват с вода без РНКаза и след това се стерилизират, за да се отстрани напълно РНКазата. Реактивите или разтворите, използвани в експеримента, особено водата, трябва да бъдат свободни от РНКаза. Използвайте вода без РНКаза за всички препарати с реагенти (добавете вода към чиста стъклена бутилка, добавете DEPC до крайна концентрация от 0,1% (V/V), разклатете през нощта и автоклавирайте).

    Напишете съобщението си тук и ни го изпратете