Универсален реагент TRNzol
Характеристика
■ Висока гъвкавост: Див диапазон на изходния обем на пробата, подходящ за екстракция на проба с голям обем в една реакция.
■ Висок добив: Методът на утаяване максимизира добива на РНК в пробата.
■ Широка употреба: Подходящ за много различни проби, като растителна и животинска тъкан, култивирани клетки, кръв, телесна течност и др.
■ Бърза работа: Геномна ДНК може да бъде получена в рамките на 1 час.
Спецификация
Тип: Въз основа на валежите
Пример: Вирус, бактерии, гъбички, животински, растителни тъкани, култивирани клетки и телесна течност.
Цел: РНК
Време на работа: ~ 1 час
Приложения: Универсалният реактив TRNzol минимизира замърсяването на примеси като ДНК и протеини в пречистената обща РНК и може да бъде директно използван за различни експерименти по молекулярна биология като Northern Blot, Dot Blot, PolyA скрининг, in vitro транслация, анализ на RNase защита, изграждане на cDNA библиотека , RT-PCR, PCR в реално време и високопроизводително секвениране.
Всички продукти могат да бъдат персонализирани за ODM/OEM. За детайли,моля, щракнете върху Персонализирана услуга (ODM/OEM)
Метод: 30 mg тъкан от черен дроб на плъх, 100 mg оризови листа се събират чрез смилане на течен азот; 1 × 106Култивирани клетки на HepG2 и 700 μl културална среда Saccharomyces Cerevisiae (OD600 = 0,9) бяха събрани чрез центрофугиране. 1 ml TRNzol универсален реагент от TIANGEN и съответните продукти от доставчик L и T бяха добавени към всяка аликвотна част от пробата и екстракцията на РНК беше извършена съгласно протоколите, предоставени от всеки доставчик. Обемът на елуиране е съответно 80 μl, 50 μl, 30 μl и 30 μl за четирите проби. 3 μl от елуата се зареждат на лента.
MIII: TIANGEN Маркер III;
Електрофорезата се провежда при 6 V/cm за 30 минути върху 1% агароза.
Резултати: Универсалният реагент TIANGEN TRNzol може да извлече РНК с висока чистота и добра цялост от черен дроб на плъх, оризови листа, култивирани клетки и дрожди, с висока ефективност. Качеството на РНК е сравнимо с или малко по -високо от това на доставчиците L и T продукти.
А-1 Клетъчен лизис или хомогенизация не са достатъчни
---- Намалете използването на проби, увеличете количеството на лизисния буфер, увеличете хомогенизацията и времето за лизис.
A-2 Количеството на пробата е твърде голямо
---- Намалете количеството използвана проба или увеличете количеството на лизисния буфер.
А-1 Недостатъчен клетъчен лизис или хомогенизация
---- Намалете използването на проби, увеличете количеството на лизисния буфер, увеличете хомогенизацията и времето за лизис.
A-2 Количеството на пробата е твърде голямо
---- Моля, вижте максималния капацитет за обработка.
А-3 РНК не се елуира напълно от колоната
---- След добавяне на вода без РНКаза, оставете я за няколко минути преди центрофугиране.
А-4 Етанол в елуента
---- След изплакване, центрофугирайте отново и отстранете измиващия буфер колкото е възможно повече.
А-5 Клетъчната хранителна среда не се отстранява напълно
---- Когато събирате клетки, моля, не забравяйте да премахнете хранителната среда колкото е възможно повече.
А-6 Клетките, съхранявани в RNAstore, не се центрофугират ефективно
---- плътността на RNAstore е по-голяма от средната среда за клетъчна култура; така че центробежната сила трябва да се увеличи. Препоръчва се центрофугиране при 3000x g.
A-7 Ниско съдържание на РНК и изобилие в пробата
---- Използвайте положителна проба, за да определите дали ниският добив е причинен от пробата.
A-1 Материалът не е свеж
---- Пресните тъкани трябва незабавно да се съхраняват в течен азот или веднага да се поставят в реагента RNAstore, за да се осигури екстракционният ефект.
A-2 Количеството на пробата е твърде голямо
---- Намалете количеството проба.
Замърсяване с А-3 РНКазаn
---- Въпреки че буферът, предоставен в комплекта, не съдържа RNase, е лесно да се замърси RNase по време на процеса на екстракция и с него трябва да се работи внимателно.
А-4 Замърсяване с електрофореза
---- Сменете буфера за електрофореза и се уверете, че консумативите и зареждащият буфер не са замърсени с РНКаза.
А-5 Твърде много натоварване за електрофореза
---- Намалете количеството зареждане на пробата, натоварването на всяка ямка не трябва да надвишава 2 μg.
A-1 Количеството на пробата е твърде голямо
---- Намалете количеството проба.
А-2 Някои проби имат високо съдържание на ДНК и могат да бъдат третирани с ДНКаза.
---- Извършете третиране с ДНКаза без РНКаза към получения разтвор на РНК и РНК може директно да се използва за последващи експерименти след третиране или може да бъде допълнително пречистена чрез комплекти за пречистване на РНК.
За стъклени съдове, изпечени при 150 ° C в продължение на 4 часа. За пластмасови контейнери, потопени в 0,5 М NaOH за 10 минути, след това старателно се изплакват с вода без РНКаза и след това се стерилизират, за да се отстрани напълно РНКазата. Реактивите или разтворите, използвани в експеримента, особено водата, трябва да бъдат свободни от РНКаза. Използвайте вода без РНКаза за всички препарати с реагенти (добавете вода към чиста стъклена бутилка, добавете DEPC до крайна концентрация от 0,1% (V/V), разклатете през нощта и автоклавирайте).
Категории продукти
ЗАЩО ИЗБЕРЕТЕ НАС
От създаването си нашата фабрика разработва първокласни продукти с придържане към принципа
първо качество. Нашите продукти са спечелили отлична репутация в индустрията и ценно доверие сред нови и стари клиенти.
- Тел: +86 010-59822688
- Сграда 5, No 86, Shuangying West Road, район Changping, Пекин.
- people@tiangen.com
